Điện di: nó là gì, nó dùng để làm gì và nó được thực hiện như thế nào
NộI Dung
Điện di là một kỹ thuật trong phòng thí nghiệm được thực hiện với mục tiêu phân tách các phân tử theo kích thước và điện tích của chúng để chẩn đoán bệnh, xác minh biểu hiện protein hoặc xác định vi sinh vật.
Điện di là một thủ tục đơn giản và chi phí thấp, được sử dụng trong các phòng thí nghiệm thường quy và trong các dự án nghiên cứu. Theo mục đích của điện di, ví dụ, có thể cần thực hiện các xét nghiệm và kiểm tra khác để chẩn đoán.
Nó để làm gì
Điện di có thể được thực hiện cho các mục đích khác nhau, cả trong các dự án nghiên cứu và chẩn đoán, vì nó là một kỹ thuật đơn giản và chi phí thấp.Do đó, điện di có thể được thực hiện để:
- Xác định vi rút, nấm, vi khuẩn và ký sinh trùng, với ứng dụng này phổ biến hơn trong các dự án nghiên cứu;
- Kiểm tra tư cách làm cha;
- Kiểm tra sự biểu hiện của các protein;
- Xác định các đột biến, hữu ích trong chẩn đoán bệnh bạch cầu, chẳng hạn;
- Phân tích các loại hemoglobin lưu hành, hữu ích trong chẩn đoán bệnh thiếu máu hồng cầu hình liềm;
- Đánh giá số lượng protein có trong máu.
Theo mục đích của điện di, có thể cần thực hiện các xét nghiệm bổ sung khác để bác sĩ hoàn thành chẩn đoán.
Nó được thực hiện như thế nào
Để thực hiện điện di, cần có gel, có thể là polyacrylamide hoặc agarose tùy theo mục đích, đệm điện di và thùng, chất đánh dấu trọng lượng phân tử và thuốc nhuộm huỳnh quang, ngoài ra còn có thiết bị đèn UV hoặc đèn LED, còn được gọi là transilluminator.
Sau khi chuẩn bị gel, phải đặt một vật cụ thể để các giếng được tạo ra trong gel, thường được gọi là lược, và để gel đông kết. Khi gel đã sẵn sàng, chỉ cần cho các chất vào các giếng. Đối với điều này, chất đánh dấu trọng lượng phân tử phải được đặt vào một trong các giếng, đối chứng dương tính, là chất đã biết nó là gì, đối chứng âm tính, đảm bảo tính hợp lệ của phản ứng và các mẫu được phân tích. Tất cả các mẫu phải được trộn với thuốc nhuộm huỳnh quang, vì bằng cách này có thể hình dung các dải trên transilluminator.
Gel với các mẫu phải được đặt trong thùng điện di, có chứa dung dịch đệm cụ thể, và sau đó thiết bị được bật để có dòng điện và do đó, chênh lệch điện thế, điều này quan trọng đối với các hạt phân tách theo tải trọng và kích thước. Thời gian chạy điện di thay đổi tùy theo mục tiêu của quy trình và có thể kéo dài đến 1 giờ.
Sau thời gian quy định, có thể xem kết quả của quá trình chạy điện di qua transilluminator. Khi gel được đặt dưới ánh sáng UV hoặc đèn LED, có thể hình dung mô hình dải: phân tử càng lớn, sự di chuyển của nó càng nhỏ, càng gần giếng, trong khi phân tử càng nhẹ thì khả năng di chuyển càng lớn.
Để phản ứng được xác nhận, các dải của mẫu chứng dương phải được nhìn thấy và không có gì phải được nhìn thấy trong mẫu chứng âm, vì nếu không thì đó là dấu hiệu cho thấy có sự nhiễm bẩn và toàn bộ quá trình phải được lặp lại.
Các loại điện di
Điện di có thể được thực hiện cho các mục đích khác nhau và tùy theo mục đích của nó, một số loại gel có thể được sử dụng, phổ biến nhất là polyacrylamide và agarose.
Điện di để xác định vi sinh vật phổ biến hơn được thực hiện trong các phòng thí nghiệm nghiên cứu, tuy nhiên, với mục đích chẩn đoán, điện di có thể được sử dụng để xác định các bệnh huyết học và các bệnh tiến triển với sự gia tăng số lượng protein, là các loại điện di chính:
1. Điện di huyết sắc tố
Điện di huyết sắc tố là một kỹ thuật trong phòng thí nghiệm được thực hiện để xác định các loại huyết sắc tố khác nhau lưu hành trong máu, giúp xác định sự hiện diện của các bệnh liên quan đến tổng hợp huyết sắc tố. Loại hemoglobin được xác định bằng phương pháp điện di ở độ pH cụ thể, lý tưởng là từ 8,0 đến 9,0, với dạng dải có thể so sánh với dạng bình thường, cho phép xác định các loại hemoglobin bất thường.
Nó được tạo ra để làm gì: Điện di huyết sắc tố được thực hiện để khảo sát và chẩn đoán các bệnh liên quan đến tổng hợp huyết sắc tố, chẳng hạn như bệnh thiếu máu hồng cầu hình liềm và bệnh huyết sắc tố C, ngoài ra còn hữu ích trong việc phân biệt bệnh thalassemia. Tìm hiểu cách giải thích điện di huyết sắc tố.
2. Điện di protein
Điện di protein là một xét nghiệm do bác sĩ yêu cầu để đánh giá số lượng protein lưu thông trong máu và từ đó xác định bệnh. Việc kiểm tra này được thực hiện từ một mẫu máu, được ly tâm để lấy huyết tương, một phần của máu bao gồm các chất khác của protein.
Sau khi điện di, một dạng dải có thể được hình dung và sau đó, một biểu đồ trong đó số lượng của mỗi phần protein được chỉ ra, là cơ sở cho chẩn đoán.
Nó được tạo ra để làm gì: Điện di protein cho phép bác sĩ điều tra sự xuất hiện của đa u tủy, mất nước, xơ gan, viêm nhiễm, bệnh gan, viêm tụy, lupus và tăng huyết áp theo mô hình dải và biểu đồ được trình bày trong báo cáo khám nghiệm.
Hiểu cách nó được thực hiện và làm thế nào để hiểu kết quả của điện di protein.